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2-NBDG测定葡萄糖实验原理


基本信息:

2-NBDG是一种荧光标记的2-脱氧葡萄糖类似物,可用作细胞葡萄糖代谢的示踪剂。当它被细胞快速摄取入胞内,摄取程度与其孵育浓度在一定范围内成正相关,此过程一定时间的荧光强度反应了葡萄糖吸收的情况,以此作为探针来测定葡萄糖。

货号:ajci4820
CAS:186689-07-6
分子式:C12H14N4O8
分子量:342.26
纯度:>98%

溶解:多羟基化合物,溶解性很好,能在水和乙醇,DMSO等有机溶剂中很好的溶解

存储:-20°C3 年
溶液:-80°C6 月

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2-NBDG结构式:

2-NBDG结构式图

监测活细胞中的葡萄糖摄取原理:

葡萄糖是一种六碳单糖,通常以游离、结合的形式,存在于动植物体内.正常人血浆中葡萄糖含量在3.89~6.11mmol/L之间,尿液中一般不含游离葡萄糖,糖尿病患者尿中的含量变化比较大。葡萄糖是维持细胞活动和组织内稳态所必需的能量来源。糖代谢是许多疾病的重要靶点,并随着病理条件的改变而改变,因此,糖代谢的评价可以作为疾病进展的重要指标。


2-NBDG是一种荧光标记的2-脱氧葡萄糖类似物,所谓的类似是指与D型葡萄糖(D-glucose)具有相同的转运体(GLUTs)和类似的胞内代谢方式,两者之间存在竞争性抑制,可用作细胞葡萄糖代谢的示踪剂,与同位素示踪相比,其无辐射损伤,具有检测方便,分辨率高等优点。当它被细胞吸收以后,荧光强度反应了葡萄糖吸收的情况,以此作为探针来测定葡萄糖摄取能力,也是判断细胞活力的指标之一,也可用于糖代谢疾病药物的评估与筛选。


2-NBDG可用于体外多种细胞,如HepG2人肝癌细胞、L6大鼠骨骼肌细胞、MCF-7乳腺癌上皮细胞和星形胶质细胞,也可用于疾病模型、癫痫大鼠、高血糖、糖尿病或小鼠异种移植瘤模型。


2-NBDG的最大激发/发射波长为475/550nm,通过葡萄糖转运蛋白进入细胞,随后被己糖激酶磷酸化并被困在细胞内。流式细胞仪检测(FL1通道)细胞产生的荧光,检测细胞对2-NBDG的摄取,荧光微孔板法测定细胞内转运的2-NBDG浓度。它也可以用荧光成像显微镜(荧光素滤片FITC)或CCD摄像机进行检测。


恭喜以下科学家使用我司2-NBDG发表文章:

1.Hindawi.Oxidative Medicine and Cellular Longevity.Volume 2022, Article ID 9148257, 24 pages

2.J. Agric. Food Chem. 2021, 69, 13838−13848

3.Free Radical Biology and Medicine.j.freeradbiomed.2022.09.029

4.Basic & Clinical Medicine.Vol.42 No.11.November 2022


参考文献:

[1].  Zou C, Wang Y, Shen Z. 2-NBDG as a fluorescent indicator for direct glucose uptake measurement[J]. Journal of biochemical and biophysical methods, 2005, 64(3): 207-215.
[2].  O’Neil R G, Wu L, Mullani N. Uptake of a fluorescent deoxyglucose analog (2-NBDG) in tumor cells[J]. Molecular Imaging and Biology, 2005, 7(6): 388-392.
[3].  Tsytsarev V, Maslov K I, Yao J, et al. In vivo imaging of epileptic activity using 2-NBDG, a fluorescent deoxyglucose analog[J]. Journal of neuroscience methods, 2012, 203(1): 136-140.
[4].  Yan Chen, Junjian Zhang, Xiang-yang Zhang, 2-NBDG as a Marker for Detecting Glucose Uptake in Reactive Astrocytes Exposed to Oxygen-Glucose Deprivation In Vitro. J Mol Neurosci (2015) 55:126–130.
[5].  Vassiliy Tsytsareva,b,1,2, Konstantin I. Maslova,1,3, Junjie Yaoa,1,3, et al, In vivo imaging of epileptic activity using 2-NBDG, a fluorescent deoxyglucose analog, J Neurosci Met


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