储备液配制方法
计算准备
在细胞实验中,我们经常要配制储备液,现在我们以C11 BODIPY 581/591荧光探针储备液的配制为例子,给大家分享下如何计算该探针溶解加入溶剂的体积。
根据相关文章或者实验经验得到工作液浓度一般为1-5um,根据我司官网得知溶解度为:30mg/ml in DMSO,换算摩尔浓度即为59.4mM(溶解度换算见下图),样品一般用DMSO溶解样品,原则上只要我们配制储备液浓度只要低于59.4mM即可,但是我们也要考虑DMSO在工作液中应<1‰ 。为了方便,我们就以每次加入1ul的储备液,然后用培养基和PBS稀释到1mL即可。计算时采用摩尔浓度计算器(见本站栏目处),步骤是逆向倒推法:

逆推计算
1. 查询我司网站BODIPY 581/591 C11的分子量为:504.4,体积为1mL,浓度为5um(配制时以浓度较高的来计算,以覆盖低浓度实验),输入以上3个数据并计算得知每次加入的探针质量为:2.522ug

2. 每次加入探针质量为2.522ug,移液器吸取体积为1ul(为了移取方便,可以设置1-5ul),输入以上两位数和分子量,即可计算出储备液的摩尔浓度为:5mM

3. 有了储备液摩尔浓度,购买包装为200ug,我们即可计算出所需要加入DMSO的体积为:79.3ul,即可配制出浓度为5mM的储备液。

注:实际上储备液和工作液之间存在一个稀释倍数关系,如果每次取储备液1ul,通常是稀释1000倍,以上举例工作液为5um,只需要配制5mM 储备液就行。